Ka DNA, RNA le non-natural nucleic acids' synthesis ', mohato oa Deprotection le Coupling o phetha karolo ea bohlokoa.
Mohato oa Deprotection ke ho tlosa sehlopha sa DMT holim'a ts'ehetso e tiileng kapa sehlopha sa 5' hydroxyl ho nucleoside e fetileng e nang le organic acid, le ho hlahisa sehlopha sa hydroxyl bakeng sa mohato o latelang oa ho kopanya.3% trichloroacetic acid e dichloromethane kapa toluene e sebelisoa haholo ho phethahatsa mohato oa tšireletso.Motsoako oa trichloroacetic acid le nako ea deprotection (nako ea ho thibela) li laola bohloeki ba lihlahisoa tsa ho qetela.Maqhubu a tlaase le nako e sa lekaneng ea ho thibela nako e siea sehlopha sa DMT se sa sebetseng, se fokotsang chai le ho eketsa litšila tse sa batleheng.Nako e telele ea ho koala e ka lebisa depurine ea tatellano e entsoeng, ho etsa litšila tse sa lebelloang.
Bohato ba Coupling bo na le kutloelo-bohloko ho boleng ba metsi a lihlapolli le mongobo o moeeng.Motsoako oa metsi ka har'a motsoako o lokela ho ba ka tlase ho 40 ppm, ho betere ho feta 25 ppm.Ho boloka boemo ba anhydrous synthesis, motsoako oa nucleic acids o lokela ho etsoa sebakeng se nang le mongobo o tlase, kahoo re khothaletsa moreki oa rona ho sebelisaThepa ea Amidites e qhibilihisitsoeng, e ka qhaqha Phosphoramidite e phofshoana kapa e mafura ka anhydrous acetonitrile ho qoba ho kopana le moea.
Kaha ho qhibiliha ha phosphoramidites ho molemo maemong ao eseng a metsi, le maraba a limolek'hule ho adsorb metsi a morao-rao ka har'a li-reagents le amidite, hoa hlokahala ho lokisaMaraba a molek'hule.Re khothaletsa 2 g subsieve bakeng sa libotlolo tsa reagent tsa 50-250ml, 5g bakeng sa libotlolo tsa reagent tse 250-500ml, 10g bakeng sa libotlolo tsa reagent tsa 500-1000ml, le 20g bakeng sa libotlolo tsa reagent tse 1000-2000ml.
Ho qhibiliha ha phosphoramidites ho lokela ho etsoa tlas'a sepakapaka sa inert, 'me sebaka sa activator reaagents le acetonitrile se lokela ho phethoa ka nako.Li-reagents tsa Capping le Oxidation li lokela ho sebelisoa kapele kamoo ho ka khonehang, li-reagents tse butsoeng li fana ka bophelo bo fokolang, le ts'ebetso e fokolang nakong ea synthesis.
Nako ea poso: Aug-09-2022